Τι πρέπει να λάβετε υπόψη όταν επιλέγετε το σωστό μικροσκόπιο για σύστημα απεικόνισης ζωντανών κυττάρων

Για την επιτυχή εκτέλεση πειραμάτων απεικόνισης ζωντανών κυττάρων, η χρήση της σωστής προσέγγισης είναι κρίσιμη. Όταν επιλέγετε ένα κατάλληλο μικροσκόπιο για την απεικόνιση ζωντανών κυττάρων, θα πρέπει να λαμβάνονται υπόψη οι ακόλουθες πτυχές: Βιωσιμότητα δείγματος, ταχύτητα λήψης εικόνας (χρονική ανάλυση) και απαιτούμενη ανάλυση και στις τρεις διαστάσεις.

During live cell imaging, certain environmental conditions must be maintained to avoid detrimental physiological changes. In order to capture physiologically relevant cellular dynamics, live cell experiments require specific environmental conditions, including temperature, pH (via CO2), and humidity control. Furthermore, some experiments may even require hypoxic conditions. Modern incubation systems not only tightly control environmental conditions, they can also provide detailed data reports and alert users to temperature, gas, or humidity variations during the course of an imaging experiment. To minimize or avoid the effects of photodamage, getting the right balance between sensitive detection, accurate label separation (if using >1 ετικέτα) και η χαμηλότερη δόση φωτός για διέγερση είναι ζωτικής σημασίας.

Για πειράματα ζωντανών κυττάρων, η απόκτηση υψηλής ταχύτητας είναι συχνά κρίσιμη, ιδιαίτερα για τη μελέτη γρήγορων δυναμικών διεργασιών όπως η παρατήρηση κυστιδίων. Η χρήση οπτικών φίλτρων οδηγεί σε περιορισμούς ταχύτητας λόγω της ανάγκης για διαδοχική απεικόνιση κατά την αλλαγή σετ φίλτρων για κάθε χρώμα, που χρησιμοποιούνται για τη μελέτη της αλληλεπίδρασης πολλαπλών στοιχείων. Η διαδοχική συλλογή εικόνων απαιτεί περισσότερο χρόνο από την ταυτόχρονη συλλογή εικόνων και, ως εκ τούτου, οι γρήγορες κινήσεις του δείγματος μπορεί να χαθούν κατά τη λήψη, καθώς κάθε χρώμα έχει μεγαλύτερο χρονικό διάστημα από τη μία εικόνα στην άλλη. Επιπλέον, όταν η άμεση σύγκριση μεταξύ δύο ή περισσότερων χρωμάτων είναι ουσιαστική, τα σήματα μπορεί να έχουν μετακινηθεί ακόμη και μεταξύ της μεμονωμένης απόκτησης των φθοροφόρων, περιπλέκοντας την ερμηνεία των δεδομένων.

Διατίθενται πολλές τεχνολογίες για τη λήψη εικόνων σε 3 διαστάσεις με την πάροδο του χρόνου. Η επιλογή του συστήματος εξαρτάται από το πείραμά σας και από το εάν η υψηλότερη ταχύτητα ή ο μικρότερος φωτισμός δείγματος κατά την απεικόνιση είναι η προτεραιότητά σας όταν αποκτάτε την επιθυμητή ανάλυση 3D. Η επιλογή του καταλληλότερου συστήματος παραδοσιακά απαιτεί από εσάς να κάνετε μια επιλογή μεταξύ ενός συστήματος απεικόνισης ζωντανών κυττάρων που βασίζεται σε κάμερα ή ομοεστιακό, ωστόσο οι σύγχρονες λύσεις μπορούν να παρέχουν και τις δύο δυνατότητες με ολοκληρωμένο τρόπο.